International Journal of Tropical Insect Science (2004) 24, 266-269
José Rivero, Ludmel Urdaneta, Normig Zoghbi, Martha Pernalete, Yasmin Rubio-Palis and Flor Herrera (2004)
Optimization of extraction procedure for mosquito DNA suitable for PCR-based techniques
International Journal of Tropical Insect Science 24 (3), 266-269
Abstract: A modified technique to extract intact DNA from Aedes aegypti and Anopheles darlingi mosquitoes is presented. The samples were treated initially with proteinase K to digest all proteinaceous matter. For both vectors, the optimum temperature for the protease treatment was 55°C and the best pre-incubation time was 4 h. RNA contamination was eliminated with RNAse treatment. The purity of the DNA was high since the A260/A280 ratio averaged >1.80 for all samples and the quantity of DNA extracted was >1.6 times higher than that using the unmodified procedure. The DNA obtained displayed clear random amplified polymorphic DNA (RAPD) profiles, which indicates that it can be used for polymerase chain reaction (PCR)-based techniques.
Cette étude présente une méthode modifiée pour l'extraction de l'ADN de haute qualité à partir de moustiques de Aedes aegypti et Anopheles darlingi. Les souches étaient traitées initialement avec proteinase K pour digérer toutes les matières protéinaseus. Ce traitement protéique montrait une température optimale de 55°C et son meilleur temps d'incubation de 4 heures pour les deux vecteurs. La pureté de l'ADN était haute puisque la moyenne de la relation A260/A280 était >1.80 pour toutes les souches. L'ADN obtenu montrait de clairs profils de RAPD ce qui indique qu'il peut être utilisé pour les techniques de PCR.
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Research topic(s) for pests/diseases/weeds:
general biology - morphology - evolution
molecular biology - genes
Pest and/or beneficial records:
Beneficial | Pest/Disease/Weed | Crop/Product | Country | Quarant.
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Aedes aegypti | Venezuela | |||
Anopheles darlingi | Venezuela |